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mTeSR?Plus(#100-0276)
是最廣泛發(fā)布的用于人ES和ips細(xì)胞的無(wú)滋養(yǎng)層的細(xì)胞培養(yǎng)基
mTeSRPlus是一種無(wú)血清、穩(wěn)定的細(xì)胞培養(yǎng)基,用于在無(wú)滋養(yǎng)層培養(yǎng)體系下維持和擴(kuò)增人胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS)細(xì)胞。它基于mTeSR1的配方,是最廣泛發(fā)布的用于人ES和iPS細(xì)胞的無(wú)滋養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)基。
mTeSRPlus通過(guò)更長(zhǎng)時(shí)間的維持培養(yǎng)基的PH穩(wěn)定和使用包括FGF2在內(nèi)的更穩(wěn)定組分,達(dá)到更穩(wěn)定均一的細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境。mTeSRPlus可防止酸中毒快速發(fā)生,有效避免在培養(yǎng)hPSC時(shí),發(fā)生與DNA損傷、基因組不穩(wěn)定和生長(zhǎng)停滯相關(guān)的狀況。這種穩(wěn)定性的增強(qiáng)提高了hPSC擴(kuò)增率、改善了克隆形態(tài),以及實(shí)現(xiàn)了真正靈活化的培養(yǎng)流程,包括可選擇周末不換液。
圖1.在mTeSR?Plus培養(yǎng)物中觀察到的正常人ES和iPS細(xì)胞形態(tài)
未分化的人類hES (H1) 和iPS (WLS-1C) 細(xì)胞在Corning®? Matrigel®? 基質(zhì)上培養(yǎng)的mTeSR?1與每日進(jìn)料或mTeSR?Plus與限制進(jìn)料。10次傳代后,細(xì)胞保留了這種細(xì)胞類型的顯著核仁和高核質(zhì)比特征。 當(dāng)細(xì)胞準(zhǔn)備好傳代時(shí),密集排列的細(xì)胞和多層是突出的。
圖2. mTeSR? Plus 在Weekend-Free的方案下維持了最適宜的pH水平
培養(yǎng)著hPSCs的mTeSR? Plus 的pH高于接種相似密度hPSCs的mTeSR?1,以及同類可使用靈活換液流程的hPSC培養(yǎng)基。培養(yǎng)72小時(shí)后測(cè)量pH值和細(xì)胞數(shù)量(72 h 內(nèi)不換液)。顯示的細(xì)胞數(shù)量范圍代表在一個(gè)傳代中觀察到的不同細(xì)胞密度。這表明使用mTeSR? Plus 在日常維持培養(yǎng)期間的任何時(shí)間都可以跳過(guò)2天換液,同時(shí)保持pH值高于7.0。注意:培養(yǎng)物在72小時(shí)前進(jìn)行雙倍換液,72 h 內(nèi)不換液,細(xì)胞數(shù)量來(lái)自6孔板的一個(gè)孔。
圖3. mTeSR? Plus 在 Weekend-Free 的方案下維持了穩(wěn)定的 FGF2 的水平
37 °C 培養(yǎng) 72 h,mTeSR? Plus 中的 FGF2 依舊維持高水平。使用 ELISA 檢測(cè)。
mTeSR?Plus的優(yōu)勢(shì)
◆ 穩(wěn)定。加強(qiáng)了緩沖體系,使用了更穩(wěn)定的成分(包括 FGF2),在保證細(xì)胞質(zhì)量的同時(shí)允許靈活的換液流程。
◆ 更快的生長(zhǎng)。細(xì)胞形態(tài)更好,生長(zhǎng)更迅速。維持更好的細(xì)胞形態(tài)和更佳的細(xì)胞生長(zhǎng)參數(shù)。
◆ 更高的克隆形成效率。與 CloneR?合用提高單細(xì)胞的存活率。
◆ 流程兼容,無(wú)縫對(duì)接。與我們已建立好的基因組編輯和分化方案完全兼容。
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