原創(chuàng)：STEMCELL

STEMCELL TECHNOLOGIES很高興向您宣布我們推出了全新升級版本的無異種成分（XF）StemSpan?培養(yǎng)基：StemSpan?-XF。

StemSpan?-XF是基于我們最初的StemSpan?H3000改進而來的，較其他XF級別競品培養(yǎng)基來說，它可以提供更高倍數(shù)的人CD34+細胞擴增。

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品優(yōu)勢

· StemSpan?-XF僅包含人源和重組人蛋白。

·支持CD34+細胞的擴增和分化，包括CD34+CD90+CD45RA-細胞。

·適用于培養(yǎng)從臍帶血，骨髓或外周血分離的人CD34 +細胞。

·與ArciTect?試劑兼容，可用于CD34+細胞基因組編輯。

產(chǎn)品定位

·我們推出的StemSpan?-XF培養(yǎng)基在目前XF級別CD34+細胞擴增培養(yǎng)基市場上有較大的競爭優(yōu)勢。這種優(yōu)勢不僅體現(xiàn)在擴增性能上，也體現(xiàn)在性價比上。

· StemSpan?-XF適用于從事人CD34+細胞培養(yǎng)和擴增/譜系特異性分化為祖細胞的科研客戶及臨床前研究的工業(yè)客戶使用。

·該培養(yǎng)基可以替代其它XF級別的競品培養(yǎng)基，例如Lonza’s standard X-VIVO 15, Thermo’s StemPro 34, Sigma’s Stemline II, or Miltenyi’s StemMACS。

· StemSpan?-XF目前還不是cGMP級別，該培養(yǎng)基適用于不立即需要cGMP級別的客戶（或是2-3年內(nèi)不需要cGMP級別的客戶）。另外，我們沒有必要將正在使用其他級別的當前StemSpan?客戶主動過渡到該培養(yǎng)基，SFEM II和StemSpan?-ACF仍然是HSPC培養(yǎng)的主推培養(yǎng)基。

      培養(yǎng)基

重點應(yīng)用方向
StemSpan?-XF可以滿足從事基礎(chǔ)研究的科研客戶和臨床前研究的工業(yè)客戶的需求：

·需要支持體外高水平CD34+細胞擴增的培養(yǎng)基。

·不想使用包含BSA /動物成分的培養(yǎng)基，例如SFEM II。

·不要立即要求使用GMP培養(yǎng)基進行研究。

·

原創(chuàng)：STEMCELL

STEMCELL TECHNOLOGIES很高興向您宣布推出CryoStor®CSB——CryoStor®凍存液的基礎(chǔ)配方。

產(chǎn)品描述：

CryoStor®凍存液的基礎(chǔ)配方（CryoStor®CS10，CS5，CS2）

與所有CryoStor®產(chǎn)品的質(zhì)量相同（GMP，無血清/無動物成分）

不含二甲基亞砜（DMSO）

單獨使用時不會有冷凍保護作用

與含DMSO的凍存液結(jié)合使用（例如CS10，BloodStor®55-5）

產(chǎn)品形式：

CryoStor® CSB優(yōu)勢：

目前該領(lǐng)域的挑戰(zhàn)：敏感細胞（如CAR-T細胞）復(fù)蘇后維持它的高細胞活力/功能可能很困難。

CryoStor® CSB可以在類似凍存液的環(huán)境中對細胞進行預(yù)處理，改善凍存工作流程，并減少細胞在DMSO中的有害影響。在凍存之前，可直接將DMSO或含DMSO的凍存液添加到CSB/細胞混合物中，而無需額外的清洗步驟。在CSB中預(yù)處理敏感細胞將最大限度地減少細胞應(yīng)激，這將增強細胞復(fù)蘇后的活力和功能。CSB（尤其是1L袋裝）可用于生物制劑生產(chǎn)的封閉式冷凍保存系統(tǒng)。

輝瑞公司的一項研究表明，將Pan T細胞和CAR-T細胞保存在CSB中，然后加入等體積的CS10（最終DMSO量稀釋為5%），可以增強凍存效果。鏈接：https://www.biolifesolutions.com/bio-preservation-evidence/cryopreservation/determination-optimal-formulation-car-t-cells-cryopreservation-studies-using-model-t-cells/。

重點應(yīng)用方向：

生物技術(shù)/制藥研究人員從事敏感類型細胞的工作，并需要改善凍存工作流程，例如：

·細胞治療實驗室

·血庫

先進的制藥用戶可能會根據(jù)他們的專利系統(tǒng)，要求CSB用于細胞制造過程的其他方面。

替代產(chǎn)品：

自配（如生理鹽水加血清）

根據(jù)輝瑞公司的上述研究，與使用CSB相比，含有生理鹽水和人血清白蛋白的配方導(dǎo)致復(fù)蘇后的成活率較低。

相關(guān)產(chǎn)品推薦：

產(chǎn)品信息：

原創(chuàng)：STEMCELL

STEMCELL TECHNOLOGIES很高興向您宣布推出以下新產(chǎn)品：

STEMdiff?小膠質(zhì)細胞培養(yǎng)基可誘導(dǎo)人造血祖細胞（HPCs）生成小膠質(zhì)細胞，幫助科研工作者研究小膠質(zhì)細胞的功能，并在2D和3D共培養(yǎng)系統(tǒng)中建立感染和神經(jīng)炎癥模型。

產(chǎn)品優(yōu)勢：

· 兼容性 - 可與上游STEMdiff?造血祖細胞試劑盒誘導(dǎo)產(chǎn)生的HPCs兼容。

· 功能性 - 使用該試劑盒生成的小膠質(zhì)細胞具有吞噬功能和對損傷的應(yīng)激反應(yīng)。

· 高效 - 可將80%以上的起始HPCs分化為小膠質(zhì)細胞。

· 高純度 - 分化后的小膠質(zhì)細胞僅有少量巨噬細胞或單核細胞污染。

· 靈活性 - 每一步分化過程中的細胞皆可凍存，培養(yǎng)體系可放大，實驗流程中可進行質(zhì)控以及調(diào)整。

重點應(yīng)用方向： 

· 神經(jīng)免疫學(xué) - 研究神經(jīng)系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)之間相互作用的實驗室。

· 神經(jīng)炎癥 - 研究神經(jīng)-免疫相互作用失衡而損害神經(jīng)系統(tǒng)，或?qū)е侣匝装Y等疾病的機制。炎癥是多種器官疾病和退化的原因，神經(jīng)系統(tǒng)也不例外，多種神經(jīng)退行性疾病都有神經(jīng)炎癥的原因，例如阿爾茨海默癥和帕金森*、創(chuàng)傷性腦損傷、額顳葉癡呆、精神分裂癥、中風、衰老。

· 阿爾茨海默病 - 阿爾茨海默病（AD）是小膠質(zhì)細胞誘導(dǎo)試劑盒最大的市場。其研究重點是小膠質(zhì)細胞和β淀粉樣蛋白共聚體之間的關(guān)系。許多遺傳風險因子作用于小膠質(zhì)細胞的特異性基因，并且有很多是作用于AD+小膠質(zhì)細胞。重要的是用STEMdiff? 小膠質(zhì)試劑盒生成的小膠質(zhì)細胞可以吞噬β淀粉樣蛋白的肽段，顯示出與疾病相關(guān)的功能。數(shù)據(jù)將于今年在FENS上發(fā)表。

· 帕金森病 - 小膠質(zhì)細胞在帕金森?。?/span>PD）患者大腦中被高度激活，針對神經(jīng)炎癥的研究是一個活躍的領(lǐng)域。小膠質(zhì)細胞對α-突觸核蛋白共聚體的反應(yīng)是研究的重點。

相關(guān)產(chǎn)品推薦：

STEMdiff? 造血祖細胞誘導(dǎo)試劑盒 #05310 - 在誘導(dǎo)小膠質(zhì)細胞之前，需要使用此試劑盒先生成造血祖細胞，這是小膠質(zhì)細胞研究的第一步，然后再購買小膠質(zhì)細胞試劑盒來誘導(dǎo)生成小膠質(zhì)細胞。

STEMdiff? 腦類器官試劑盒? #08570 - 可使用STEMdiff? 小膠質(zhì)試劑盒進行小膠質(zhì)細胞和腦類器官的共培養(yǎng)。 關(guān)于共培養(yǎng)的技術(shù)公告正在制作中，具體實驗流程請暫時參考文獻（Abud et. al., 2017），該論文顯示了腦類器官中的小膠質(zhì)細胞的分布和功能。

STEMdiff? 前腦神經(jīng)元培養(yǎng)基 #08600 + #08605 - 研究小膠質(zhì)細胞客戶會對我們的STEMdiff? 前腦神經(jīng)元培養(yǎng)基感興趣，此試劑盒誘導(dǎo)產(chǎn)生前腦型谷氨酸能神經(jīng)元的混合細胞群，受到許多神經(jīng)研究者的歡迎。關(guān)于共培養(yǎng)的技術(shù)公告正在制作中，請參考文獻（Haenseler et. al., 2017），文章揭示了小膠質(zhì)細胞-神經(jīng)元共培養(yǎng)的優(yōu)勢?？蛻艨赡苁褂米耘潴w系，但STEMdiff試劑盒使用更方便，重復(fù)性更高。

BrainPhys? #05790 - 做任何神經(jīng)培養(yǎng)的研究人員都可能考慮從一種僅維持神經(jīng)細胞生存的基礎(chǔ)培養(yǎng)基轉(zhuǎn)換成一種生理相關(guān)性更好的培養(yǎng)基例如BrainPhys?，BrainPhys?是一種支持神經(jīng)元活動的成熟培養(yǎng)基。

細胞因子 - 小膠質(zhì)細胞釋放多種細胞因子，并對多種細胞因子產(chǎn)生反應(yīng)，例如IL-10、TNF-α、IL-6，且仍有一些細胞因子正在研究中。請詢問客戶可能對哪些細胞因子感興趣。 

技術(shù)資源：

神經(jīng)退行性疾病模型中人多能干細胞產(chǎn)生小膠質(zhì)細胞的研究

hPSC來源的神經(jīng)細胞手冊

參考文獻：

1. Caldwell et. al., 2020.Maximising the potential of neuroimmunology. Brain, Behavior, and Immunity.

2. Abud et. al., 2017.iPSC-derived human microglia-like cells to study neurological diseases. Neuron.

3. Mariani et al., 2016. Microglia in Infectious Diseases of the Central Nervous System.  Neuroimmune Pharmacology.

4. Haenseler et. al., 2017A Highly Efficient Human Pluripotent Stem Cell Microglia Model Displays a Neuronal-Co-culture-Specific Expression Profile and Inflammatory Response. Stem Cell Reports.  

原創(chuàng)：STEMCELL

STEMCELL TECHNOLOGIES很高興向您宣布推出EasySep? Release Human CD45 Positive Selection Kit。

產(chǎn)品信息：

該產(chǎn)品適用于從人原代組織和腫瘤組織（例如腫瘤浸潤性白細胞[TIL]）的單細胞懸液或人源化小鼠的組織和異種移植腫瘤中分離CD45 +白細胞。

EasySep? Release Human CD45 Positive Selection Kit

產(chǎn)品規(guī)格：

產(chǎn)品優(yōu)勢：

·無堵塞-無柱系統(tǒng)消除了貴重樣品發(fā)生堵塞從而損失細胞的風險。

·靈活性-有適用于多種樣本的方案，如人和人源化小鼠的正常組織和腫瘤組織。

·細胞無磁珠-細胞分選后可以進一步釋放磁珠，從而得到無磁珠的陽選細胞。這些細胞可立即用于進一步的免疫細胞亞群分離，下游分析或培養(yǎng)。

·快速高效-簡單一倒就能獲得白細胞的41分鐘操作方案。

磁極兼容性：

EasySep? Release Human CD45 Positive Selection Kit 與以下磁極兼容：

·“The Big Easy” EasySep? Magnet

· EasyEights? EasySep? Magnet

· EasyPlate? EasySep? Magnet

·RoboSep?-S

·RoboSep?-16(contact RND or PSS)

目標客戶：

主要研究領(lǐng)域:

從人源化小鼠的腫瘤或組織中分離白細胞，以研究與免疫細胞相關(guān)的病理學(xué)，例如

·腫瘤(e.g.cancer therapeutics effects in humanized NSG PDX mice)

·傳染病(e.g.HIV in the context of cancer使用BLT小鼠)

·從人原代組織或腫瘤組織中分離白細胞，以研究廣泛與免疫細胞相關(guān)的病理學(xué)，例如：

·腫瘤(e.g.TIL characterization in hepatocellular carcinoma)

·炎性疾病(e.g.tissue-resident monocyte classification in rheumatoid arthritis patients)

·肝硬化(e.g.characterization of normal and diseased liver tissue-resident immune cells)

常見的下游應(yīng)用包括：

·流式檢測或分選(免疫表型和/或亞型分選)

·RNA 測序 (包括單細胞測序如 10X Genomics)

·細胞因子分析

·基因組分析

·細胞培養(yǎng)(包括擴增和共培養(yǎng))

相關(guān)產(chǎn)品推薦：

市場資源：

產(chǎn)品手冊:Tools for Your Immunology Brochure

科學(xué)海報: 2020 Tissue Immunity Keystone Symposium - coming soon to the website

官網(wǎng)數(shù)據(jù) - 包括流式圖，多種組織的分選純度，CYTOF 和ELIspot 數(shù)據(jù)。

技術(shù)竅門:Tissue Dissociation Protocol Guide

產(chǎn)品價格：

原創(chuàng)：STEMCELL

很高興向您宣布STEMCELL TECHNOLOGIES推出的第一個腎臟產(chǎn)品！

產(chǎn)品描述

STEMdif? 腎臟類器官試劑盒是一個完整的、無血清的細胞培養(yǎng)基系統(tǒng)，支持從人多能干細胞（hPSC）在一個簡單的兩步分化方案中高效和可重復(fù)地誘導(dǎo)生成腎臟類器官。

這些腎臟類器官由足細胞、近端小管、遠端小管以及相關(guān)的內(nèi)皮細胞和間充質(zhì)組成，為發(fā)育生物學(xué)和疾病模型的研究提供了生理相關(guān)模型：

使用STEMdiff?腎臟類器官試劑盒生成的腎臟類器官可用于高通量篩選表型腎毒性化合物。

腎毒性化合物篩選：慶大霉素

STEMdif?腎臟類器官試劑盒是基于Drs. Benjamin Freedman 和 Joseph Bonventre的技術(shù)開發(fā)的。

產(chǎn)品規(guī)格以及目錄價

產(chǎn)品實驗流程

產(chǎn)品優(yōu)勢

生理相關(guān)性。能夠產(chǎn)生模擬發(fā)育中腎元及相關(guān)內(nèi)皮和間充質(zhì)的人腎臟器官。

簡單。使用兩步培養(yǎng)體系和易于操作的實驗步驟，簡化培養(yǎng)流程。

可靠。通過優(yōu)化的配方和嚴格的質(zhì)量控制降低實驗批間差異。

高通量。可使用96孔板或384孔板培養(yǎng)腎臟類器官。

適用客戶

（1）基礎(chǔ)研究

·腎臟發(fā)育和功能研究

·間充質(zhì)-上皮轉(zhuǎn)化

·常規(guī)或腎特異性細胞生物學(xué)

·疾病建模：多囊腎病(PKD)、髓質(zhì)囊腎病(MCKD)、腎友病(NPHP)、阿爾波特綜合征和巴特綜合征

（2）轉(zhuǎn)化研究

·遺傳疾病(如PKD)的精準醫(yī)療方法

·腎毒性藥物篩選

COVID-19研究相關(guān)文獻支持

（1）非典：

·536例SARS患者中，36例（6.7%）出現(xiàn)急性腎功能損害。

·SARS-CoV患者中，急性腎功能損害患者的死亡率明顯高于無腎功能損害的患者（91.7%比8.8%）（P<0.0001）(Chu et al. Kidney Int 2005)

（2）腎臟中ACE2的表達和功能

·人類蛋白質(zhì)圖譜數(shù)據(jù)顯示，人腎組織切片中ACE2和TMPRSS2都有表達。

·腎小管細胞表達ACE2和二肽基肽酶-4，分別被鑒定為SARS-CoV和MERS-CoV的受體。(Li W et al. Nature 2003) (Raj VS et al. Nature 2013)

·糖尿病中的蛋白尿和腎小管損傷與腎小管ACE2的下調(diào)有關(guān) (Tikellis et al. Hypertension 2003)。進一步抑制ACE2會加重小鼠模型的腎損傷 (Soler et al. Kidney international 2007)。

·重組人ACE2可在降低血壓的同時減少腎損傷 (Oudit et al. Diabetes 2010)。

（3）hPSC誘導(dǎo)生成的腎臟類器官、ACE2和COVID-19研究

·hPSC誘導(dǎo)生成腎臟類器官的方法，是由Nuria Montserrat優(yōu)化了Josef Penninger細胞雜志發(fā)表的培養(yǎng)方法。這些腎臟類器官表達ACE2，并且可感染SARS-CoV-2 (Monteil et al. In Press 2020)。

·STEMCELL研發(fā)中心正在進行檢測試劑盒的研發(fā)，以在基因和蛋白水平檢測STEMdif?腎臟類器官試劑盒生成的類器官中ACE2的表達及其區(qū)域特異性。

相關(guān)產(chǎn)品

*試劑盒與TeSR Plus的兼容性仍需測試。

原創(chuàng)：STEMCELL

STEMCELL TECHNOLOGIES很高興向您宣布推出兩款新的培養(yǎng)基產(chǎn)品：

STEMdiff?前腦神經(jīng)元誘導(dǎo)分化試劑盒（#08600）

STEMdiff?前腦神經(jīng)元成熟試劑盒（#08605）

這兩款產(chǎn)品通過易于使用的標準化試劑盒，從神經(jīng)前體細胞誘導(dǎo)分化至神經(jīng)元。使用此系統(tǒng)誘導(dǎo)的神經(jīng)元可適用于最主流的PSC-神經(jīng)分化工作流程。與上一代STEMdiff?神經(jīng)元分化試劑盒相比，這套產(chǎn)品使用更簡易，并且是以BrainPhys?為基礎(chǔ)培養(yǎng)基的成熟系統(tǒng)。此產(chǎn)品已上傳至官網(wǎng)，并且可訂購發(fā)貨。

產(chǎn)品優(yōu)勢：

生理優(yōu)勢：更好的和BrainPhys?神經(jīng)元培養(yǎng)基配合使用，用于更相關(guān)和更成熟的神經(jīng)元培養(yǎng)系統(tǒng)；

兼容性：更好的與STEMdiff?神經(jīng)系統(tǒng)培養(yǎng)基以及TeSR?產(chǎn)品配套使用；

效率高：能夠分化生成≥90%的神經(jīng)元，星形膠質(zhì)細胞≤10%；

可重復(fù)：允許從多種iPS和ES細胞系中分化和成熟神經(jīng)元；

方便：使用類胚體或單層培養(yǎng)的方式，都可以使用這套產(chǎn)品誘導(dǎo)分化成神經(jīng)元。

STEMdiff?前腦神經(jīng)元分化和成熟試劑盒是PSC-神經(jīng)實驗流程的核心產(chǎn)品。

?首先使用STEMdiff?SMADi神經(jīng)誘導(dǎo)試劑盒生成神經(jīng)前體細胞（NPC）；

?然后使用STEMdiff?神經(jīng)祖細胞培養(yǎng)基擴增NPC；

?使用STEMdiff?前腦神經(jīng)元試劑盒將NPC最終分化為神經(jīng)元。

新的STEMdiff?前腦神經(jīng)元系統(tǒng)與上一代STEMdiff?神經(jīng)元系統(tǒng)的區(qū)別。

?STEMdiff?前腦神經(jīng)元分化試劑盒和STEMdiff?前腦神經(jīng)元成熟試劑盒誘導(dǎo)分化神經(jīng)元的流程更加靈活穩(wěn)定；

?培養(yǎng)基的體積做了優(yōu)化，增加了成熟培養(yǎng)基的量，以更好地適應(yīng)長期成熟培養(yǎng)；

?新的STEMdiff?前腦神經(jīng)元分化和成熟試劑盒的價格與上一代試劑盒相同；

?STEMdiff?前腦神經(jīng)元分化試劑盒已從3個組分簡化為2個組分，便于儲存和使用；

?如果BrainPhys?對培養(yǎng)和成熟神經(jīng)元如此有效，為什么STEMdiff?神經(jīng)系統(tǒng)不使用BrainPhys?？現(xiàn)在是了！

?PSC誘導(dǎo)形成的神經(jīng)元在生理活性介質(zhì)（如BrainPhys?中）中成熟更快，表達更多神經(jīng)疾病相關(guān)蛋白（如Tau）的成人特異性亞型（Miguel，2019）。

表1：上一代和新一代STEMdiff?神經(jīng)分化和成熟系統(tǒng)的比較。兩代試劑盒生成相類型的前腦神經(jīng)元

目標市場：

一、做以下神經(jīng)生物學(xué)研究的客戶

細胞內(nèi)轉(zhuǎn)運、神經(jīng)發(fā)育、神經(jīng)外泌體、氯菊酯轉(zhuǎn)運、神經(jīng)修復(fù)、脊髓損傷。

二、做神經(jīng)學(xué)疾病研究的科研客戶以及工業(yè)客戶

神經(jīng)發(fā)育疾病研究室：神經(jīng)退行性疾?。ǔ墒焐窠?jīng)元是這些神經(jīng)退行性疾病研究非常相關(guān)的細胞模型，新的STEMdiff?前腦神經(jīng)元分化和成熟試劑盒具有很強的優(yōu)勢）、老年癡呆癥、帕金森氏癥、亨廷頓癥、肌萎縮側(cè)索硬化癥（ALS）。

研究其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病的實驗室

自閉癥、注意力缺陷障礙、雙相情感障礙、精神分裂癥。

交叉銷售：

?mTeSR Plus?：每個STEMdiff?神經(jīng)體系的銷售機會都是mTeSR?Plus機會。有許多研究神經(jīng)科學(xué)的客戶使用其他的PSC維持培養(yǎng)基，但由于我們的PSC-神經(jīng)體系產(chǎn)品豐富，客戶使用STEMCELL的產(chǎn)品進行神經(jīng)分化。STEMdiff?神經(jīng)系統(tǒng)培養(yǎng)基是PSC維持培養(yǎng)的一個很好的切入口。所有STEMdiff?神經(jīng)產(chǎn)品均經(jīng)驗證可與mTeSR?Plus協(xié)同工作。

?BrainPhys?：研究人員可能會考慮將神經(jīng)基礎(chǔ)的培養(yǎng)基（僅維持神經(jīng)細胞存活）轉(zhuǎn)換為一種生理條件下培養(yǎng)具活性神經(jīng)元的培養(yǎng)基，如BrainPhys?，一種支持神經(jīng)元活性的成熟培養(yǎng)基。STEMdiff?前腦神經(jīng)元成熟試劑盒的基礎(chǔ)培養(yǎng)基是BrainPhys?。

?神經(jīng)添加劑：SM1和N2-A或N2-B。神經(jīng)元需要培養(yǎng)一段時間才能成熟，無論它們是原代來源還是PSC來源。SM1基于Brewer最初的B27配方，在自配培養(yǎng)基中可以直接替換B27。如果客戶注意到神經(jīng)突觸的成熟或外觀的變化，他們應(yīng)該嘗試對SM1和B27進行比較測試。N2添加劑同樣可以替換。

?STEMdiff?SMADi神經(jīng)誘導(dǎo)培養(yǎng)基：客戶要進行前腦神經(jīng)元分化和成熟之前，必須先使用神經(jīng)誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)生成神經(jīng)前體細胞。STEMdiff?SMADi系統(tǒng)是我們最受歡迎、增長最快的誘導(dǎo)生成神經(jīng)前體細胞的試劑盒。

技術(shù)資源：

hPSC Neural Brochure

PSC Brochure

BrainPhys? Webpage

BrainPhys? Brochure

mTeSR? Plus Brochure

Neural Supplements Flyer

STEMCELL Neural Products Webpage

原創(chuàng)：STEMCELL

STEMCELL TECHNOLOGIES很高興向您宣布推出STEMdiff? 神經(jīng)嵴分化試劑盒(#08610)。該試劑盒擴充了STEMCELL神經(jīng)產(chǎn)品系列，鞏固了我們在支持hPSC向神經(jīng)分化研究方向的領(lǐng)先地位。

優(yōu)勢：

l快速：簡單的單層培養(yǎng)流程，僅需6天即可生成神經(jīng)嵴細胞；

l高效：在已分化的細胞中，多能神經(jīng)嵴細胞達70%以上；

l多能：生成的神經(jīng)嵴細胞可繼續(xù)分化為周圍神經(jīng)元、軟骨細胞或成骨細胞等；

l通用：與在mTeSR?1, mTeSR? Plus, or TeSR?-E8?中維持培養(yǎng)的多能干細胞均可兼容。

STEMdiff神經(jīng)嵴分化試劑盒可誘導(dǎo)人多能干細胞向神經(jīng)方向分化：

l神經(jīng)嵴誘導(dǎo)試劑盒能生成多潛能的神經(jīng)嵴細胞（NCCs） ——此類細胞具有部分中胚層特性和部分外胚層特性；

l神經(jīng)嵴細胞的特征并不明顯——NCCs具有多分化潛能，可通過是否具備分化成下游多種類型細胞的能力來鑒定NCCs；

l我們的產(chǎn)品生成的NCCs純度高于任何自配配方 ——能用于神經(jīng)嵴生物學(xué)的研究；使下游分化更便捷。

多潛能神經(jīng)嵴細胞可分化成以下細胞：

l感覺神經(jīng)元

l施萬細胞

l腸神經(jīng)元

l顱面部神經(jīng)元

l黑色素細胞

l成骨細胞

l軟骨細胞

目標客戶：

l做神經(jīng)嵴研究的實驗室：使用PSC生產(chǎn)神經(jīng)脊或做神經(jīng)脊生物學(xué)研究的實驗室。包括通過干細胞研究發(fā)育生物學(xué)的實驗室。這些實驗室具有最直接的銷售機會。

l做感覺神經(jīng)元和疼痛研究的實驗室：

大多數(shù)的神經(jīng)元細胞系都不適合用于研究持續(xù)性疼痛的機制。目前最常用于疼痛研究的神經(jīng)元細胞系是SH-SY5Y和兩個背根神經(jīng)節(jié)雜交瘤細胞系（F-11 、 ND7/23）。這些細胞系都不表達TRP離子通道、鉀離子通道、電壓依賴性鈉離子通道的基因，這些離子通道在疼痛調(diào)節(jié)中都非常重要。

動物模型沒有人類相關(guān)性，對藥理學(xué)研究至關(guān)重要。雖然來自于嚙齒類動物背根神經(jīng)節(jié)（DRG）的原代感覺神經(jīng)元和人周圍感覺神經(jīng)元不同，但兩者表達類似的離子通道基因，普遍認為這是研究周圍神經(jīng)系統(tǒng)（PNS）持續(xù)性疼痛最合適的細胞模型。但是需要把動物殺死。

做疼痛研究或者相關(guān)受體研究的實驗室，可以先使用STEMdiff神經(jīng)嵴分化試劑盒得到神經(jīng)嵴細胞，再生成感覺神經(jīng)元。

l其他實驗室：

先天性巨結(jié)腸病——神經(jīng)嵴來源的腸神經(jīng)元未正常分布，導(dǎo)致腸蠕動和腸動力缺失；

唇腭裂——常見顱面部發(fā)育失調(diào) ；特雷徹·柯林斯綜合癥——顱面部發(fā)育失調(diào)的一種 ；

神經(jīng)纖維瘤病I型——1/3000人患有這種神經(jīng)腫瘤 ；

成神經(jīng)細胞瘤——在全身和皮膚表面神經(jīng)上生長的腫瘤；

黑色素瘤——神經(jīng)嵴黑素細胞皮膚癌；

外周神經(jīng)痛——神經(jīng)嵴細胞是感覺神經(jīng)元和周圍神經(jīng)系統(tǒng)的前體。

交叉銷售機會：

lBrainPhys?：

研究人員可以考慮把基礎(chǔ)培養(yǎng)基Neurobasal，換成更好的維持神經(jīng)元活性的培養(yǎng)基，BrainPhys?。

l神經(jīng)添加劑：

SM1和N2A。無論是培養(yǎng)原代神經(jīng)元還是從PSC誘導(dǎo)到神經(jīng)元，在培養(yǎng)過程中均需添加神經(jīng)添加劑。SM1優(yōu)化自B27，在自配體系中可以直接替代B27。如果發(fā)現(xiàn)神經(jīng)元成熟度或神經(jīng)突觸外觀有變化，則應(yīng)嘗試對SM1和B27進行一些比較測試。

lSTEMdiff?腸類器官試劑盒：

很多客戶對腸道神經(jīng)元和腸類器官的共培養(yǎng)感興趣。STEMdiff?神經(jīng)嵴分化試劑盒誘導(dǎo)形成的神經(jīng)嵴細胞可繼續(xù)分化成腸道神經(jīng)元，與STEMdiff?腸類器官試劑盒配合使用，可進行先天性巨結(jié)腸等疾病的研究。

lMesenCult?-ACF Plus：

使用MesenCult?-ACF Plus培養(yǎng)基培養(yǎng)，神經(jīng)嵴細胞可傳代3次。想繼續(xù)往中胚層下游分化的客戶，需要使用MesenCult?-ACF Plus培養(yǎng)基來擴增神經(jīng)嵴細胞。

lMesenCult?-ACF軟骨分化試劑盒、MesenCult?-ACF成骨分化試劑盒、MesenCult?-ACF成脂分化試劑盒：適用于想做這些下游分化的客戶。

資源：
hPSC-Neural Brochure (page 7)
Pain Research Forum – 關(guān)于疼痛研究的網(wǎng)頁信息
產(chǎn)品報價：

原創(chuàng)：STEMCELL

STEMCELL TECHNOLOGIES很高興向您宣布推出三個新的EasySep?試劑盒，這是STEMCELL在非人靈長類（NHP）的第一批成品（OTS）的細胞分選產(chǎn)品。 我們以前將這些分選試劑盒作為定制產(chǎn)品提供，現(xiàn)在將它們作為成品提供，為使用非人靈長類樣本的客戶提供更多的便利。

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

這些產(chǎn)品在不過柱的情況下，可在短短20分鐘內(nèi)從新鮮或冷凍的非人靈長類的PBMC中分離出T細胞亞群。

產(chǎn)品規(guī)格

正裝包含1管抗體混合物和2-3管EasySep?磁珠（＃19250），正裝可處理1 x 10^9個細胞。試用裝可處理3 x 10^8個細胞。

產(chǎn)品優(yōu)勢

快速、無柱：20至25分鐘，比Miltenyi產(chǎn)品快2-3倍；

簡單：沒有上游清洗步驟，只需一個抗體混合物；

沒有生物素：與下游實驗的一致性和兼容性更高；

方便：客戶現(xiàn)在可以更快、更簡單的訂購這些成品試劑盒，而不需要走定制流程。

產(chǎn)品性能和競品情況

磁極兼容性

EasySep?非人類靈長類T、CD4+T、CD8+T細胞分選試劑盒可兼容磁極：

EasySep?磁極；

“The Big Easy”EasySep?磁極；

RoboSep?-S。

要使用EasySep?其他磁極分選非人靈長類免疫細胞，請聯(lián)系PSS

技術(shù)要點

樣本來源：在PBMC樣本上已經(jīng)過優(yōu)化，從以前的定制情況上看，這些試劑盒在定制時也已成功用于淋巴結(jié)和脾臟樣品。

樣本準備

對于超過24小時的外周血樣本，在細胞分選之前需要用氯化銨裂解紅細胞；

對于凍存的PBMC，在細胞分選之前，需要對樣本進行DNAse I處理并過濾；

對于小體積樣本，建議使用標準的15 mL錐形管（＃38009），而非SepMate?，以提高PBMC的回收率；

分離PBMC時，Lymphoprep?的濃度因物種而異：

恒河猴，使用100%濃度Lymphoprep?；

食蟹猴，使用D-PBS（不含Ca ++和Mg ++）將Lymphoprep?稀釋至90％，以減少單個核細胞層的紅細胞和粒細胞污染。

流式細胞染色和設(shè)門注意事項

由于存在紅細胞殘留，因此需要使用CD45抗體（特別是克隆號D058-1283）（強烈建議）

還需要使用細胞活性染料（強烈建議）

目標市場

工業(yè)和科研在使用非人類靈長類動物模型研究的免疫學(xué)研究領(lǐng)域，包括：

傳染?。ɡ绨滩《?/span>/艾滋病，結(jié)核病，黃熱?。?/span>；

自身免疫性疾病，尤其是需要縱向研究的慢性疾病（例如多發(fā)性硬化）；

移植；

免疫治療；

毒理學(xué)。

交叉銷售

市場宣傳材料和銷售支持

手冊：免疫學(xué)工具手冊；

宣傳單：非人類靈長類細胞分選；

網(wǎng)站：EasySep?（常規(guī)）和分選定制。

產(chǎn)品目錄價

原創(chuàng)：STEMCELL

阿爾茨海默?。?span>Alzheimer's disease，AD）是最常見的神經(jīng)退行性疾病。Alzheimer's association（AAIC）的數(shù)據(jù)顯示：

lAD是美國排名第六的致死原因。

lAD患者的看護需要大量的精力，也給家庭帶來了巨大的經(jīng)濟負擔。

l2000-2017年間，死于心臟疾病的患者下降了9%，而死于AD的患者增加了145%。

l每3個老年人中就有1個死于AD或者另外一種癡呆（dementia）。

l2019年，AD和dementia在美國預(yù)計的花費為2900億美金，這個數(shù)字預(yù)計會在2050年到達11000億美金。

l2019年，美國AD患者的人數(shù)在580萬，這個數(shù)字預(yù)計在2050年到達接近1400萬。

*數(shù)據(jù)來源：2019 Alzheimer's Disease Facts and Figures Report

引起AD的原因目前尚未明確，疾病發(fā)展目前認為與大腦中的Beta-Amyloid和Tau蛋白有關(guān)，近期也有研究認為大腦中的免疫細胞-小膠質(zhì)細胞可能介導(dǎo)了Tau蛋白聚集。目前AD的研究工具包括原代神經(jīng)元，轉(zhuǎn)基因動物模型，3D腦類器官等。

3D腦類器官

靈長類動物的大腦是高度復(fù)雜和有組織性的結(jié)果，2D的原代神經(jīng)元模型包括hPSC衍生的神經(jīng)元模型重現(xiàn)腦組織復(fù)雜結(jié)構(gòu)的能力較為有限，而嚙齒類動物（包括小大鼠）與靈長類動物的大腦相比結(jié)構(gòu)更加簡單（不含有OSVZ區(qū)域）。hPSC衍生的腦類器官則是一種三維（3D）體外培養(yǎng)系統(tǒng)，能夠重現(xiàn)人腦發(fā)育過程和發(fā)育中的人腦結(jié)構(gòu)。它們提供了一種模擬人體生理環(huán)境的體外模型，專用于研究人神經(jīng)系統(tǒng)特有的神經(jīng)發(fā)育和疾病過程。

而從FAD和一些SAD病人的iPS衍生的神經(jīng)元具有Tau蛋白的磷酸化水平升高和Beta-Amyloid聚集，從AD病人來源的3D腦類器官也同時具有Beta-Amyloid的聚集和類似neurofibrillary tangles的Tau磷酸化水平升高。因此，近期也有很多科學(xué)家使用3D腦類器官進行AD的相關(guān)研究。

STEMdiff?腦類器官試劑盒為無血清培養(yǎng)系統(tǒng)，用于從人ES和iPS生成腦類器官。它是基于由Madeline Lancaster和Jürgen Knoblich教授所發(fā)布的配方¹。

圖1.使用STEMdiff?腦組織類器官試劑盒生成的腦組織類器官

（A）使用STEMdiff? 腦組織類器官試劑盒在第40天生成的整個腦組織類器官的相位對比圖。箭頭所指處為皮層類似區(qū)域。（B）免疫組化分析結(jié)果顯示這些皮層類似區(qū)域具有頂祖標志物PAX6（紅色）和神經(jīng)標志物β-tubulin III（綠色）。（C-F）（B）圖框內(nèi)區(qū)域的放大圖像。（C）PAX6 (紅色) / β-tubulin III (綠色)。（D） CTIP2 (紅色) / β-tubulin III (綠色)。（E）和（F）Ki-67（綠色）和核染料DAPI（藍色）共同標記的增殖中的組細胞。（F）室下區(qū)類似區(qū)域可見一個額外的Ki-67+細胞群。比例尺=（A）1 mm，（B）500 μm 和（C-F）200 μm。在培養(yǎng)腦類器官時，與那些未經(jīng)質(zhì)控的自配試劑相比，該試劑盒顯著提升了類器官（包括從難分化的細胞系）形成的效率（圖2）。

（A）圖2.與使用未經(jīng)質(zhì)控的試劑所生成的腦類器官相比，使用STEMdiff?腦類器官試劑盒生成的腦類器官在質(zhì)量、產(chǎn)量和標志物表達上的表現(xiàn)都更為優(yōu)異。

（A）使用STEMdiff?腦類器官試劑盒生成的腦類器官，在第40天發(fā)展出厚組織樣結(jié)構(gòu)，且直徑超過 1 mm。（B）使用未經(jīng)質(zhì)控的試劑生成的類器官在第40天并未發(fā)育出厚組織，而是形成了較大的含液胞囊。（C）RT-qPCR分析顯示，在使用STEMdiff?腦類器官試劑盒所生成的腦類器官中，神經(jīng)祖細胞與成熟神經(jīng)元出現(xiàn)上調(diào)；（D）對比之下，采用未經(jīng)質(zhì)控的試劑生成的類器官顯示出較差的神經(jīng)元標志物表達（平均數(shù) ±SEM，每個細胞系的n = 2；每個分析涉及6個類器官）。數(shù)據(jù)以18S/TBP為標準，并與未分化的hPSC對照組相比較。（A）和（B）的比例尺 = 1 mm

已使用腦類器官進行造模的疾病有：

l小頭畸形²

lZIKA病毒誘導(dǎo)的小頭畸形^3-6

l可卡因的作用⁷

l自閉癥譜系障礙/提摩西綜合癥⁸

l阿爾茨海默病⁹

l小膠質(zhì)瘤¹⁰

^lMiller-Dieker綜合癥^11-12

如何從人多能干細胞生成腦類器官？

如何從人多能干細胞生成腦類器官的詳細操作步驟，包括類胚體的形成、神經(jīng)誘導(dǎo)、神經(jīng)上皮擴張和類器官的成熟（圖3）。

圖3.腦類器官生成示意圖

將在mTeSR1?中維持培養(yǎng)的人多能干細胞（胚胎干細胞或誘導(dǎo)多能干細胞）使用溫和細胞解離試劑（GCDR）解離為單細胞懸液，以密度為9000細胞/孔接種至U-Bottom 96孔超低粘附培養(yǎng)板（Corning®）中，接種培養(yǎng)基為EB形成培養(yǎng)基 + 10 μM Rho-kinase抑制劑（ROCKi）。每隔2天更換為不含ROCKi的EB形成培養(yǎng)基。5天之后，將EBs轉(zhuǎn)移到含有誘導(dǎo)培養(yǎng)基的24孔超低粘附培養(yǎng)板（Corning®）中。對EB培養(yǎng)2天后，使用液體Matrigel®（減少生長因子，Corning®）包被EBs。接下來將它們轉(zhuǎn)移到經(jīng)過無組織培養(yǎng)處理的6孔板（12-16類器官/孔）中。嵌入的類器官在擴張培養(yǎng)基中維持培養(yǎng)3天。在第10天時，將類器官轉(zhuǎn)換到成熟培養(yǎng)基中，然后放置在RPM為57-95的定軌搖床（Infors HT）上對其進行培養(yǎng)。在成熟培養(yǎng)基中，每3-4天進行換液。在第40天時，類器官進行RT-qPCR分析或冰凍切片后進行免疫染色。EBs形成、誘導(dǎo)和類器官擴張的比例尺 = 300 μm。類器官成熟的比例尺 = 1 mm。

原代神經(jīng)元培養(yǎng)
標準化的神經(jīng)元培養(yǎng)添加物（如Brewer's B27）包含了多種復(fù)雜的成分13-15。這些原料及相關(guān)制造過程的質(zhì)量差異性都將導(dǎo)致該添加物的品質(zhì)的變化，已有報道表明該情況會對神經(jīng)元培養(yǎng)造成負面影響15，16。

NeuroCult? SM1（STEMCELL優(yōu)化后的）是根據(jù)已發(fā)表B27配方1開發(fā)設(shè)計的，且經(jīng)過優(yōu)化，對于支持成熟神經(jīng)元的培養(yǎng)具有更出色的一致性（圖4）。NeuroCult? SM1神經(jīng)元培養(yǎng)基添加物的設(shè)計和生產(chǎn)均為培養(yǎng)出可重復(fù)的、高品質(zhì)的培養(yǎng)物做了充足的準備。在開發(fā)過程中，我們首先對已發(fā)表的添加物進行了多因素實驗13,14，確定NeuroCult? SM1的配方和原料的精確規(guī)格。精選的原料由可靠的供應(yīng)商提供，并選用適當?shù)闹亟M或合成原材料作為組分的替代物。隨后，建立最佳的制造工藝來生產(chǎn)這些多組分添加物。

圖4.使用SM1培養(yǎng)體系培養(yǎng)的大鼠原代神經(jīng)元具有突觸前和突觸后標志物的表達

在SM1培養(yǎng)體系中培養(yǎng)的E18大鼠原代皮層神經(jīng)元。在培養(yǎng)第21天，神經(jīng)元表型成熟，具有廣泛的樹突棘表達和樹突前標志物synapsin（A，C；綠色）和樹突后標志物PSD-95（A，B；紅色）的表達和分布。Synapsin集中在神經(jīng)元胞體和軸突上分散的小突分布，軸突由MAP2（A，D；藍色）標記。

與競品（添加有B27的Neurobasal^®）相比，SM1培養(yǎng)系統(tǒng)中具有更多β-微管蛋白III陽性表達的神經(jīng)元，細胞活力顯著提升（圖5），并且SM1批次間的穩(wěn)定性要更好。另外，我們發(fā)現(xiàn)神經(jīng)元在添加有SM1的培養(yǎng)基中具有更多的神經(jīng)突生長/分支，以及正常的電生理特征（實驗數(shù)據(jù)未顯示）。

圖5. SM1培養(yǎng)體系可大大提高細胞存活率

（A）在SM1培養(yǎng)體系或競品體系（添加有B27的Neurobasal^®）中培養(yǎng)21天的E18大鼠原代皮層神經(jīng)元。在SM1體系中培養(yǎng)的神經(jīng)元數(shù)量顯著性高于競品體系（n=4；mean± 95% CI；*p < 0.05)。（B）在添加有SM1或B27類似競品（競品1，2，3）的Neurobasal^®中培養(yǎng)21天的E18大鼠原代皮層神經(jīng)元。使用SM1培養(yǎng)的神經(jīng)元數(shù)量與競品相當，但批次間的穩(wěn)定性較高。

想做神經(jīng)元的電生理實驗？您需要BrainPhys?神經(jīng)元培養(yǎng)基。

Do your neurons fire together?

圖6.在BrainPhys?完全培養(yǎng)基（BP）、Neurobasal®完全培養(yǎng)基（NB）、突觸抑制劑（BP+抑制劑）和咖啡因（BP+咖啡因）條件下培養(yǎng)的神經(jīng)元的平均連接率。

n=3（每個條件下進行了3次獨立的細胞實驗）；one-way ANOVA，F(3,8) = 854，P<0.0001，使用Tukey's multiple comparisons檢驗：ns=不顯著，????P < 0.0001。圖片引用自Saber WA et al. (2018) All-Optical Assay to Study Biological Neural Networks. Front. Neurosci. 12:451. doi: 10.3389/fnins.2018.00451的圖4D。遵循CC BY 4.0. Copyright © 2018 Afshar Saber, Gasparoli, Dirks, Gunn-Moore and Antkowiak。

參考文獻

1. Lancaster M et al. (2014) Nat Protoc 9(10): 2329-40.

2. Lancaster MA et al. (2013). Nature 501(7467): 373-9.

3. Wells MF et al. (2016). Cell Stem Cell 19(6): 703-8.

4. Garcez PP et al. (2016). Science 352(6287): 816-8.

5. Cugola FR et al. (2016). Nature 534(7606): 267-71.

6. Dang J et al. (2016) Cell Stem Cell 19(2): 258-65.

7. Lee CT et al. (2017). Neuropsychopharmacology 42(3): 774-84.

8. Mariana J et al. (2015) Cell 162(2): 375-90.

9. Raja WK et al. (2016) PLoS One 11(9): E0161969.

10. Hubert CG et al. (2016) Cancer Res 76(8): 2465-77.

11. Bershteyn M et al. (2017) Cell Stem Cell 20(4): 435-49.

12. Iefremova V et al. (2017) Cell Rep 19(1): 50-9.

13. Brewer GJ et al. (1993) J Neurosci Res. 35(5): 567-76.

14. Brewer GJ and Cotman CW. (1989) Brain Res. 494(1):65-74.

15. Chen Y et al. (2008) J Neurosci Methods 171(2):239-47.

16. Cressey D. (2009) Nature 459: 19.